GFP+神经元的百分比表明质粒表达取决于剂量,剂量为0.6 ug/mL时百分比最高。

对 GFP MFI 也观察到了同样的剂量反应模式,每次处理 n=3,采用Dunnett多重比较检验进行单因素方差分析,**** p<0.0001, ** p<0.005。
用包封GFP 编码质粒DNA 的脂质纳米粒处理过的DIV 7大鼠原代神经元中GFP表达的流式细胞分析。在最高剂量(0.6 ug/mL) 下,超过60% 的神经元表达了GFP。GFP阳性百分比和GFP表达强度(平均荧光强度;MFI)均可通过GFP质粒-脂质纳米粒的剂量进行滴定测量。在有1 μg/mL ApoE的情况下处理48 小时后,进行流式细胞分析。

DiD+神经元的百分比表明脂质纳米粒摄取取决于剂量,剂量为0.6 ug/mL时百分比最高。

对 DiD MFI 也观察到了这样的剂量反应模式,每次处理n=3,采用Dunnett多重比较检验进行单因素方差分析,**** p<0.0001,** p<0.005。
对大鼠原代神经元中质粒-脂质纳米粒摄取的流式细胞分析。在DIV 7用含有质粒DNA的脂质纳米粒和荧光染料DiD对细胞进行处理。质粒剂量为0.6 μg/mL时,超过95%的神经元表现出脂质纳米粒摄取;在该剂量的十分之一(0.06 μg/mL) 下,摄取率超过85%。在有1 μg/mL ApoE的情况下处理48 小时后,进行流式细胞分析。
附加表征
未观察到脂质纳米颗粒存在细胞毒性

Spark和Benchtop的包封率接近 100%

脂质纳米颗粒粒径大小不受质粒长度影响

由于样品切换的缘故,在Benchtop上制备的质粒脂质纳米颗粒粒径较小。

基于微流控的NanoAssemblr?技术能够以可重复的方式制备质粒-脂质纳米粒,这些颗粒可在体内外有效介导原代神经元中的基因表达,表明在NanoAssemblr?平台上制备的质粒-脂质纳米粒是神经科学应用领域的有效输送工具。
在NanoAssemblr 平台上制备质粒-脂质纳米颗粒

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