全身成像技术在探索生理系统在维持健康和驱动疾病方面的相互作用方面发挥着至关重要的作用。最近，在《nature biotechnology》上发表了一项名为“Whole-body cellularmapping in mouse using standard IgG antibodies”的研究。该研究由麦鸿成博士所在的德国慕尼黑大学团队进行，他们推出了wildDISCO，一种用于小鼠全身免疫标记、光学透明和成像的新方法，该方法避免了对转基因报告动物或纳米抗体标记的依赖，从而克服了现有的技术限制。
研究人员发现，七（2,6-二-O-甲基）-β-环糊精是强效胆固醇提取剂和膜渗透剂，能够使标准抗体深入均匀地穿透入组织内部而不会聚集。WildDISCO通过标记多样的内源性蛋白质，在整个小鼠中以细胞分辨率实现外周神经系统、淋巴管和免疫细胞的成像。此外，他们还研究了罕见的增殖细胞，以及在无菌小鼠中证明了的生物扰动的影响。他们应用wildDISCO绘制了乳腺癌背景下的三级淋巴结构，同时考虑了原发肿瘤和整个小鼠体内的转移瘤。
图1使用wildDISCO对小鼠整体进行全面的神经解剖学和淋巴图谱分析
a）深度颜色标记展示2.0厘米厚的整个小鼠体内不同z水平的泛神经元标记PGP 9.5+神经元投影。比例尺为2000 μm。b，c）整个硬组织（椎骨）（b）和软组织（脂肪组织）（c）的神经支配细节。比例尺为200 μm。d）光学2D切片显示PGP 9.5+神经支配多个器官。比例尺为1200 μm。e）支配肾脏（洋红色）、肾上腺（绿色）、输尿管（青色）的分段迷走神经用特定的伪彩突出显示。比例尺为800 μm。f）在多个器官上追踪TH+迷走神经。从脊髓底部到颈部，一条追踪的迷走神经被洋红色遮盖，绿色为肾脏，青色为肝脏。比例尺为4000 μm。g）可以确定小鼠迷走神经轨迹的更高放大倍数。比例尺为1500 μm。h）用淋巴管标记物LYVE1（黄色）染色的整只小鼠。比例尺为2000 μm。i）在小鼠脑实质中检测到淋巴（LYVE1）染色。比例尺为150 μm。j）用两种不同的淋巴管标记物（LYVE1和podoplanin）对小鼠大脑进行染色，以识别大脑区域中发现的淋巴管内皮细胞。比例尺为100 μm。b–j，n=3。
图2使用wildDISCO对不同生理系统进行染色。
a）用抗TH（绿色）和免疫细胞标记CD45（洋红色）抗体染色的小鼠的最大信号强度投影，显示内脏器官中神经免疫相互作用的情况。比例尺为1000 μm。b）交感神经系统的分支（TH，绿色）连接肠道的不同区域。CD45+细胞（洋红色）沿着交感神经的部分聚集，特别是在肠系膜下丛。比例尺为200 μm。c，a）标记区域的高放大倍数视图，显示交感神经纤维和免疫细胞在肠壁上的共定位。比例尺为200 μm。d）用TH和CD45染色的淋巴结(LN)中具有免疫调节作用的外围神经的代表性2D光学切片。比例尺为100 μm。e）用TH（绿色）和LYVE1（黄色）染色的整只小鼠的最大信号强度投影。比例尺为3000 μm。f，g）用TH和LYVE1(f)以及PGP 9.5和Prox1(g)染色的后肢LN的代表性2D光学切片，如图所示，显示LN由具有免疫调节潜力的外围神经支配。比例尺为150μm。
样本展示
整鼠脑透明化后放置锘海LS18平铺光片显微镜样品仓内效果图
LS18平铺光片显微镜-样品仓多尺寸可选
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