从组织透明化到光片显微成像

近年来，针对大尺度生物样品（如小鼠全脑，脊髓）的新型样品处理方法以及三维显微成像方法已经逐渐兴起。研究者可采用CUBIC，CLARITY，BABB，uDISCO/iDISCO，等多种透明化方法对不同类型的大样品进行透明化处理，之后运用光片照明显微镜等新型成像系统快速获得未经切片的完整大组织三维图像。

锘海生物科学仪器（上海）股份有限公司作为一家创新型的科技公司，致力于为中国的科研及教学工作者提供好的技术手段和技术服务。针对大尺度生物样品三维荧光成像，我公司为科研，教学及医疗工作者们提供了从组织透明化到3D荧光成像一整套完整解决方案。

针对样品的透明化，我们采用SHIELD这一新型的透明化方法，该方法是在CLARITY透明化基础上进行了改进，研究者从蛋白质构象保护出发，从上百种化学试剂中筛选出了P3PE，其环氧化作用很好的保护了组织内源性蛋白质、荧光蛋白，同时具有降低自发荧光等性能。

针对大组织样品的3D荧光成像，锘海采用与西湖大学高亮验室共同研制的光片照明显微镜Nuohai LS 18，其运用创新的平铺光片技术，克服了传统光片显微镜中空间分辨率、光学层析能力和成像视野大小之间的矛盾，从而获得均匀高分辨率的3D荧光图像。

案例展示

Thy1-eGFP小鼠半脑透明化及成像实测案例展示

Step 1：SHIELD透明化

未用SHIELD透明的半脑                                    已用SHIELD透明的左半脑

Step 2：Nuohai LS 18 成像（4×8个视野，厚度6.5 mm，5×放大，下列所有图片与视频都源于同一组数据，数据未做去卷积处理，且由于上传限制，视频与图片都做过降采样）

半脑完整效果展示

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取Bregma 0.19—Bregma -1.71范围内的3个视野局部展示

取Bregma 0.19—Bregma -1.71范围内的1个视野细节展示

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服务项目介绍

1.透明化

SHIELD技术可实现脑，肾，心，肺，肠等多种组织器官的透明化，透明全过程仅需7天。对蛋白结构及荧光的保存具有数周的稳定性。

SHIELD固定剂（4天）

Smartclear Pro II快速透明化（3天）

详见

SHIELD—新一代组织透明化及免疫荧光标记解决方案

2. 透明化样品成像

Nuohai LS 18 采用平铺光片技术，保证视野内的均匀高分辨率，同时可以根据样品大小以及研究目的选用不同的分辨率和放大倍数进行成像。该显微系统是为透明化大样品而设计，可适用于多种水溶性透明化(SHIELD,CLARITY, CUBIC等)和有机溶剂透明化(BABB，iDISCO/uDISCO, PEGASOS等)处理的样品。

详见

锘海 LS 18光片照明显微镜

3.数据处理

针对透明化样品的大量数据（TB数量级的数据），我们也可进行基本的定制化3D渲染，以辅助老师们分析和观察数据。

欢迎感兴趣的老师来咨询相关服务，拨打021-37827858了解更多信息。